顯微鏡行業(yè)*德國徠卡顯微鏡2014年技術(shù)

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三維定位顯微鏡的新型超分辨率系統(tǒng)

05 九月 2013

Leica SR GSD 3D - 三維單分子和細胞結(jié)構(gòu)的高度和可重復的定位

德國韋茨拉爾。超分辨率是光學顯微鏡的大勢所趨。徠卡擴展了其超高分辨率顯微鏡產(chǎn)品組合，現(xiàn)已推出了Leica SR GSD 3D，一個同時能為分子和細胞結(jié)構(gòu)提供二維和三維超分辨率成像的廣角系統(tǒng)。寬視場熒光顯微鏡采用了GSD（基態(tài)耗盡）ordSTORM技術(shù)，達到了橫向20納米、軸向50nm的分辨率。Leica SR GSD 3D也以其在定位單分子、其系統(tǒng)穩(wěn)定性及其光學性能方面*的性贏得好評。這些屬性對于在很短的時間內(nèi)產(chǎn)生可重現(xiàn)性的高品質(zhì)結(jié)果是*的。Leica SR GSD 3D的優(yōu)勢通過全自動系統(tǒng)和軟件的簡單操作而實現(xiàn)的。

Leica SR GSD3D配備了專門為超高分辨率顯微鏡開發(fā)的160倍的高性能物鏡。其設(shè)計進行了優(yōu)化，可用于高功率激光輻射。極低的自體熒光保證了較高的信噪比，這對于單分子檢測應用是頗為理想的。為了能在z向上進行分子定位，即焦平面的上方和下方，Leica SR GSD 3D采用了像散效果。像散實際上是一種像差，但卻是特意用柱面透鏡創(chuàng)造出來的。對應的圖像能夠確定檢測到的分子的z位置，從而實現(xiàn)三維重建。為了保證結(jié)果的可重復性，柱面透鏡能地定位到光路中，只要該系統(tǒng)從二維切換到三維錄制-不是用手，而是用鼠標點擊通過軟件控制來自動完成。

Leica SR GSD 3D已以多種方式進行了優(yōu)化，可產(chǎn)生可靠的定位結(jié)果。所有的光學元件在復消色差方面均進行了修正，達到了較高的徠卡標準。在此基礎(chǔ)上，該軟件使系統(tǒng)能進行的校準，對x、y和z中的分子進行定位。 除了用黃金珠進行標準的校準外，也可用樣本的熒光珠或染料分子進行特定顏色的校準。特殊的SuMo技術(shù)（SUpressed MOtion）確保檢測過程中漂移量zui低，穩(wěn)定性zui高。

“對具備納米級分辨率的細胞結(jié)構(gòu)進行三維觀察可以讓科學家們在生物醫(yī)學研究中獲得新的見解，”徠卡公司的廣角成像主管Sebastian Tille解釋說。“比如，新型Leica SR GSD 3D是一個*的工具，能更好地了解分子結(jié)構(gòu)或細胞蛋白輸運過程。專家已經(jīng)確認了*批測試之后新系統(tǒng)出色的性能和可靠性。

Leica SR GSD 3D是基于一個全自動的TIRF系統(tǒng)（全內(nèi)反射熒光），允許超分辨率與TIRF顯微鏡相結(jié)合。該系統(tǒng)也可用于活細胞或先進的熒光顯微鏡的各個領(lǐng)域中的各種應用。作為一個多功能系統(tǒng)，Leica SR GSD 3D使研究人員可以按其所需自由地將系統(tǒng)進行地定制。GSD技術(shù)的另一個重要的優(yōu)點是，它可與標準的熒光標記共同使用。Leica SR GSD 3D是Leica SR GSD的升級版，多次受到專家委員會的認可，如獲得的R＆D100大獎。

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